Pecyn Elisa gwrthgorff Brucella

Manyleb

 

Prawf Gweithdrefnau a Dehongli

 

Cam 1 Gweithdrefn Prawf

1.1 Paratoi Datrysiad Golchi

Wcrynodiad orking wAshing hylif:Cyn ei ddefnyddio, dylid adfer yr hydoddiant golchi i dymheredd yr ystafell (gradd 20-25) a'i ysgwyd yn gyfartal i'w wneud yn unffurf. Yna gwanhewch 20 gwaith yr hydoddiant golchi dwys gyda dŵr wedi'i buro (er enghraifft, ychwanegir toddiant golchi dwys 5ml at ddŵr wedi'i buro 95ml), cymysgu'n dda, a gellir storio'r hylif golchi gwanedig ar radd 2-8 am 7 diwrnod.

1.2 Paratoi sampl

① Cymerwyd gwaed anifeiliaid twll, wedi'i centrifugio ar 4000rpm am 10 munud, a chasglwyd uwchnatur. Gellir ceulo serwm hefyd yn naturiol heb hemolysis.

② Pan fydd maint y sampl yn fawr, er mwyn sicrhau bod yr amser ymateb arbrofol yn gyson. Cymysgwch y sampl serwm gyda'r toddiant gweithio gwrthgorff yn 1: 1 yn y plât gwanhau (sampl serwm 70UL + 70 UL Datrysiad Gweithio Gwrthgyrff). Mae'r rheolaeth negyddol a'r rheolaeth gadarnhaol yr un fath â'r sampl serwm.

1.3 Gweithdrefn Prawf

① Cymerwch y label ensym microplate (yn ôl nifer y samplau, gellir ei ddadosod a'i ddefnyddio sawl gwaith), sefydlu dwy ffynnon yr un ar gyfer rheolyddion negyddol a chadarnhaol, ychwanegwch 100ul o'r gymysgedd premixed i'r microplate label ensymau. Ysgwydwch y sampl yn y ffynnon yn ysgafn, gan ddefnyddio'r ffilm plât selio i orchuddio'r plât, a deori ar 37 gradd am 30 munud.

②Open y ffilm plât selio, ysgwyd y toddiant yn y plât yn dda, ychwanegwch 300µl o hylif golchi canolbwyntio gweithio i bob ffynnon, ac yna taflu'r hylif yn y ffynnon. Ailadroddwch y camau uchod 5 gwaith, ac yn olaf patiwch sych ar bapur amsugnol glân.

③Densym iluted conjugate:Gwanhewch yr ensym conjugate (50 ×) 50 gwaith (er enghraifft: Mae dwysfwyd conjugate ensym 20UL + 980 ul diluent 1, mae'r swm penodol sy'n ofynnol yn cael ei gyfrif yn ôl nifer y samplau prawf), cymysgu'n dda a'i roi o'r neilltu.

④add 100µl o ensym yn cyd -fynd â phob ffynnon, gorchuddiwch y plât, a'i ddeor ar 37 gradd am 30 munud.

Plât ensymau golchiel, mae'r gweithrediad penodol yr un peth â'r uchod ②.

Datrysiad swbstrad ⑥Add 100µl i bob ffynnon, gorchuddiwch y plât a'i ddeor am 10 munud ar 37 gradd i ffwrdd o'r golau.

Datrysiad stop ⑦Add 50µl i bob ffynnon, a phenderfynu ar y canlyniad o fewn 5 munud.

 

Cam 2 Dehongli Canlyniadau

 

Darllenwyd gwerth OD450 pob ffynnon ar y darllenydd microplate 96- yn dda.

2.1 Dilysu

 

Roedd gwerth cyfartalog OD45 0 nm o reolaeth gadarnhaol yn <0.35 ac roedd gwerth OD450NM cyfartalog rheolaeth negyddol/rheolaeth gadarnhaol yn fwy na neu'n hafal i 3.5, roedd y canlyniadau arbrofol yn ddilys. Fel arall, dylid ailadrodd y prawf.

2.2 Dull Cyfrifo

Ar gyfer pob sampl, cyfrifwch y Pi (blocio bwyta) fel a ganlyn gan ddefnyddio'r sampl wedi'i gywiro a'r gwerthoedd rheoli:

2.3 Dehongli Canlyniadau

Pan fydd Pi <20%, mae'n cael ei farnu fel rhywbeth negyddol.

Pan fydd pi> 30%, mae'n cael ei farnu ei fod yn gadarnhaol.

Pan fydd 20% yn llai na neu'n hafal i DP yn llai na neu'n hafal i 30%, mae'n cael ei farnu ei fod yn amheus, ac mae'n awgrymu ailadrodd samplu a phrofi wythnos yn ddiweddarach.

Tagiau poblogaidd: Brucella gwrthgyrff Elisa Kit, China Brucella Gwrthgyrff Cyflenwyr Kit Elisa, Gwneuthurwyr, Ffatri