Firws syndrom atgenhedlu ac anadlol mochyn gwrthgorff firws elisa pecyn

Manyleb

Prrsv ab elisa

Defnydd a fwriadwyd: Yr atgenhedlu mochyn ac anadlol

Mae pecyn canfod gwrthgorff firws syndrom ar gyfer pennu gwrthgorff PRRSV penodol yn serwm mochyn in vitro. Defnyddir y prawf i asesu'r brechiad o

imiwneiddio ag atgenhedlu mochyn a

Brechlyn firws syndrom anadlol ffermydd moch.

Sbesimen: serwm

Deunyddiau a ddarperir:

Prawf Gweithdrefnau a Dehongli

Cam 1 Gweithdrefn Prawf

1.1 Paratoi Datrysiad Golchi

Wcrynodiad orking wAshing hylif:Cyn ei ddefnyddio, dylid adfer yr hydoddiant golchi i dymheredd yr ystafell (gradd 20-25) a'i ysgwyd yn gyfartal i'w wneud yn unffurf. Yna gwanhewch 20 gwaith yr hydoddiant golchi dwys gyda dŵr wedi'i buro (er enghraifft, ychwanegir toddiant golchi dwys 5ml at ddŵr wedi'i buro 95ml), cymysgu'n dda, a gellir storio'r hylif golchi gwanedig ar radd 2-8 am 7 diwrnod.

1.2 Paratoi sampl

① Cymerwyd gwaed anifeiliaid cyfan, ei centrifugio ar 4000rpm am 10 munud, a chasglwyd uwchnatur. Gellir ceulo serwm hefyd yn naturiol heb hemolysis.

② Gwanhewch y sampl serwm 1:50 (ychwanegwch sampl serwm 3ul i sampl 147ul diluent) a'i gymysgu'n drylwyr.

Nodyn: Mae angen gwanhau rheolaethau negyddol a chadarnhaol hefyd.

1.3 Gweithdrefn Prawf

① Cymerwch y microplate label ensym (yn ôl nifer y samplau, gellir ei ddadosod a'i ddefnyddio sawl gwaith), ychwanegwch 100ul o'r serwm gwanedig at ficroplate label yr ensym, gosodwch ddwy ffynnon yr un ar gyfer samplau negyddol a chadarnhaol, ac ychwanegwch 100ul yr un ar gyfer negyddol ar gyfer negyddol a rheolaethau cadarnhaol i'r adwaith yn dda yn y drefn honno. Ysgwydwch y sampl yn y ffynnon yn ysgafn, gan ddefnyddio'r ffilm plât selio i orchuddio'r plât, a deori ar 37 gradd am 30 munud.

②Open y ffilm plât selio, ysgwyd y toddiant yn y plât yn dda, ychwanegwch 300µl o hylif golchi canolbwyntio gweithio i bob ffynnon, ac yna taflu'r hylif yn y ffynnon. Ailadroddwch y camau uchod 5 gwaith, ac yn olaf patiwch sych ar bapur amsugnol glân.

Mae ③Add 100µl o ensym yn cyd -fynd â phob ffynnon, yn gorchuddio'r plât, a'i ddeor ar 37 gradd am 45 munud.

④Open y ffilm plât selio, ysgwyd y toddiant yn y plât yn dda, ychwanegwch 300µl o hylif golchi canolbwyntio gweithio i bob ffynnon, ac yna taflu'r hylif yn y ffynnon. Ailadroddwch y camau uchod 5 gwaith, ac yn olaf patiwch sych ar bapur amsugnol glân.

Datrysiad swbstrad ⑤Add 100µl i bob ffynnon, gorchuddiwch y plât a'i ddeor am 10 munud ar 37 gradd i ffwrdd o'r golau.

Datrysiad stop ⑥Add 50µl i bob ffynnon, a phenderfynu ar y canlyniad o fewn 5 munud.

Cam 2 Dehongli Canlyniadau

Darllenwyd gwerth OD450 pob ffynnon ar y darllenydd microplate 96- yn dda.

2.1 Dilysu

Roedd gwerth OD450NM cyfartalog rheolaeth negyddol<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Dull Cyfrifo

Ar gyfer pob sampl, cyfrifwch y S/P fel a ganlyn gan ddefnyddio'r sampl wedi'i gywiro a'r gwerthoedd rheoli:

2.3 Dehongli Canlyniadau

Pan s/p<0.46, it is judged as negative.

Pan fydd S/P yn fwy na neu'n hafal i 0. 56, fe'i barnir ei fod yn bositif.

Pan 0. 46 yn llai na neu'n hafal i s/p<0.56, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Tagiau poblogaidd: syndrom atgenhedlu ac anadlol mochyn gwrthgorff firws cit elisa, llestri mochyn atgenhedlu a syndrom anadlol gwrthgorff firws cyflenwyr cit elisa, gweithgynhyrchwyr, ffatri